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So optimieren Sie Säulenvolumen für bestmögliche Resultate

Eine Säule erreicht dann die bestmögliche Trennung, wenn zusätzliches Säulenvolumen so gering wie möglich gehalten wird. Dies gilt besonders für kürzere, hocheffiziente Säulen. Erfahren Sie, wie Sie ungewollte Peakverbreiterungen vermeiden und die Auflösung somit optimieren können.

 

Extra Säulenvolumen bezeichnet in einem HPLC-System das Volumen ausserhalb der Säule. Zusätzliches Säulenvolumen trägt zum Gesamtpeakvolumen bei und sollte minimiert werden, um die Leistung der Säule zu maximieren. Nur so kann die beste Trennung erreicht werden, welche die Säule im Stande ist zu leisten.

Die meisten neueren HPLC-Systeme sind darauf optimiert, hocheffiziente SPP- und Fused-Core-Säulen, wie diese von HALO®, zu verwenden. Viele ältere Chromatographen sind weiterhin in Gebrauch. Betrieben mit längeren Säulen deren Phasen mit großen Partikeln gepackt sind, hat das zusätzliche Säulenvolumen in den Injektions- und Verbindungsschläuchen nur eine geringe Auswirkung auf Auflösung und Peakbreite. Bei der Umstellung auf kürzere, hocheffiziente Säulen muss dieses zusätzliche Säulenvolumen reduziert werden um eine ungewollte Peakverbreiterung zu vermeiden, welche die Auflösung und damit die Genauigkeit der quantitativen Ergebnisse beeinträchtigen kann. Allgemein kann gesagt werden, dass das extra Volumen auf weniger als die Hälfte des gesamten Peakvolumens beschränkt sein sollte, um 90% der maximalen Auflösung einer Säule zu erreichen.

Dieses Video erklärt, worauf zu achten ist und wie man das Säulenvolumen einstellen und beeinflussen kann. Erfahren Sie auch mehr über die möglichen Modifikationen, um mit einer konventionellen HPLC-Anlage Resultate mit erhöhter Effizienz und Basislinientrennung zu erreichen, ähnlich der einer UHPLC-Anlage.


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